उत्पाद विवरण:
भुगतान & नौवहन नियमों:
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| स्थान: | झिल्ली | प्रकार: | आयन चैनल प्रोटीन |
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| दिखावट: | Lyophilized या तरल | मेगावाट: | 40 केडीए |
| सीएफपीएस सिस्टम: | ई। कोलाई अर्क | साधन: | Nanodisc |
| हाई लाइट: | Alpha Hemolysin Cell Free Protein,E.Coli Lysates Cell Free Protein,40 kDa Cell Free Protein |
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हमारी कंपनी अल्फा हेमोलीसिन, बैक्टीरिया विष, सेल मुक्त प्रोटीन को नैनोडिस्क द्वारा पृथक करती है, जो सेल मुक्त अभिव्यक्ति के लिए E.coli lysates पर आधारित है। सेल-फ्री प्रोटीन रहा हैकार्य की पुष्टि हुई।
परिचय
संसाधनों की अपनी लड़ाई में, जीवाणु स्टेफिलोकोकस ऑरियसस्रावी अल्फा-हेमोलिसिन मोनोमर्स जो अतिसंवेदनशील कोशिकाओं के बाहरी झिल्ली को बांधता है।बांधने पर, मोनोमर्स पानी से भरे ट्रांसमिम्ब्रेन चैनल का निर्माण करते हैं जो पानी, आयनों और छोटे कार्बनिक अणुओं के अनियंत्रित परमिट की सुविधा प्रदान करता है।एटीपी जैसे महत्वपूर्ण अणुओं का तेजी से निर्वहन, झिल्ली क्षमता और आयनिक ग्रेडिएंट्स का अपव्यय, और अपरिवर्तनीय आसमाटिक सूजन, जो कोशिका की दीवार टूटना (लसीका) के लिए अग्रणी होती है, मेजबान कोशिका की मृत्यु का कारण बन सकती है।इस रोमकूप बनाने वाली संपत्ति की पहचान एक प्रमुख तंत्र के रूप में की गई है, जिसके द्वारा प्रोटीन विषाक्त पदार्थ कोशिकाओं को नुकसान पहुंचा सकते हैं।अल्फा-हेमोलिसिन नाम प्रारंभिक टिप्पणियों से निकला है जो लाल रक्त कोशिकाओं पर विष की लिटीक गतिविधि स्थापित करता है।अब यह उम्मीद की जाती है कि, यदि पर्याप्त खुराक में लागू किया जाता है, तो अल्फा-हेमोलिसिन किसी भी स्तनधारी कोशिका झिल्ली को पार कर सकता है।हालांकि अधिकांश मानव आबादी के लिए अल्फा-हेमोलिसिन का स्राव एक गंभीर स्वास्थ्य जोखिम पैदा नहीं करता है, गंभीर स्टेफिलोकोकल संक्रमण पैदा कर सकता हैhemostasisगड़बड़ी, थ्रोम्बोसाइटोपेनिया, तथा फेफड़े घावों ।
क्रिस्टलोग्राफिक संरचना इकट्ठे हुए अल्फा-हेमोलिसिन ने चैनल के एक हेपेटेट्रिक संगठन का खुलासा किया।प्रोटीन में मशरूम जैसी आकृति होती है, जिसमें 50A बीटा-बैरल स्टेम होता है, जो कैप डोमेन से लिपिड बाईलेयर के माध्यम से कोशिका के आंतरिक भाग में फैलता है।प्रोटीन की टोपी सेल के बाहरी से जुड़े एक बड़े वेस्टिब्यूल को कैप के शीर्ष पर एक बड़े उद्घाटन के माध्यम से छुपाती है।चैनल का सबसे संकीर्ण (1.4 ~ एनएम व्यास) हिस्सा स्टेम के आधार पर स्थित है, जहां बीटा-बैरल छिद्र वेस्टिबुल से जुड़ता है।सात साइड चैनल वेस्टिबुल से कोशिका के बाहरी हिस्से तक जाते हैं, जो झिल्ली की सतह के पास से बाहर निकलते हैं।यह आंकड़ा अपने मूल वातावरण में अल्फा-हेमोलिसिन के 268,000-परमाणु मॉडल को दर्शाता है - एक लिपिड बिलीयर।
आवेदन
अल्फा-हेमोलिसिन के कई गुण इस झिल्ली चैनल को विभिन्न जैव-प्रौद्योगिकीय अनुप्रयोगों के लिए उपयुक्त बनाते हैं: इकट्ठे हुए अल्फा-हेमोलिसिन पीएच और तापमान की एक विस्तृत श्रृंखला पर स्थिर होता है, इसके ट्रांसमिम्ब्रेन पोर सामान्य परिस्थितियों में खुले रहते हैं, अल्फा-हेमोलिसिन विभिन्न जैविक या सिंथेटिक को बांध सकता है। लिपिड bilayers, बंधन सहजता से आगे बढ़ता है और विशिष्ट आयनिक स्थितियों की आवश्यकता नहीं होती है।
ए। वितरण सिस्टम। अल्फा-हेमोलिसिन के ट्रांसमेम्ब्रेन पोर, आयनों और छोटे कार्बनिक यौगिकों जैसे कि शर्करा या न्यूक्लियोटाइड की एक कोशिका के प्लाज्मा झिल्ली के पार या सिंथेटिक लिपिड पुटिकाओं की दीवारों के माध्यम से नियंत्रित वितरण की सुविधा प्रदान कर सकते हैं।आनुवंशिक रूप से इंजीनियर अल्फा-हेमोलिसिन का उपयोग करना, जिसके लिए विधानसभा और चालन को प्रकाश सहित बाहरी जैव रासायनिक या भौतिक उत्तेजनाओं द्वारा चालू या बंद किया जा सकता है, एक लिपिड बिलीयर को छोटे विलेय की इच्छा के लिए पारगम्य बनाया जा सकता है।
ख। स्टोचैस्टिक सेंसर।एक लिपिड बाईलेयर में निलंबित, एक अल्फा-हेमोलिसिन चैनल एक स्टोकेस्टिक सेंसर बन जाता है जब एक आणविक एडाप्टर को आनुवंशिक रूप से फिर से इंजीनियर स्टेम के अंदर रखा जाता है, जो एक अनुप्रयुक्त बायोम द्वारा प्रेरित ट्रांसमेब्रेनर आयनिक वर्तमान को प्रभावित करता है।आणविक एडाप्टर के लिए विश्लेषणात्मक के प्रतिवर्ती बाइंडिंग क्षणिक रूप से आयनिक वर्तमान को कम करता है।वर्तमान कटौती का परिमाण विश्लेषण के प्रकार को इंगित करता है, जबकि वर्तमान में कमी अंतराल की आवृत्ति विश्लेषण एकाग्रता को दर्शाती है।इस तरह के स्टोकेस्टिक सेंसर को एक साथ मापने के लिए प्रदर्शित किया गया था, एक एकल तत्व तत्व के साथ, कई कार्बनिक विश्लेषणों की सांद्रता और दो या अधिक द्वीपीय धातु आयनों के समाधान सांद्रता।अल्फा-हेमोलिसिन के नैनोमीटर आकार के छिद्र का उपयोग एक दूसरे प्रकार के स्टोचैस्टिक सेंसर में एक साथ दो अलग-अलग प्रोटीन की सांद्रता निर्धारित करने के लिए किया गया था।
सी। डीएनए श्रृंखला बनाना। अल्फा-हेमोलिसिन के ट्रांसमेम्ब्रेनर छिद्र न केवल छोटे विलेय का संचालन कर सकते हैं, बल्कि बड़े (केडीए के दसियों) रैखिक मैक्रोमोलेक्यूल्स भी कर सकते हैं।इस प्रकार, एक ट्रांसमीटर क्षमता द्वारा संचालित, डीएनए या आरएनए किस्में अल्फा-हेमोलिसिन के छिद्र के माध्यम से तब्दील हो सकती हैं, आयनिक वर्तमान अवरोधों का उत्पादन करती हैं जो व्यक्तिगत किस्में की रासायनिक संरचना को दर्शाती हैं।ऐसे कई रुकावट धाराओं के सांख्यिकीय विश्लेषण ने शोधकर्ताओं को आरएनए और डीएनए होमोपॉलिमर के विभिन्न अनुक्रमों के भेदभाव के साथ-साथ एक एकल आरएनए अणु के भीतर प्यूरिन और पाइरीमिडीन न्यूक्लियोटाइड के खंडों की अनुमति दी।डीएनए हेयरपिन के लिए एक एकल न्यूक्लियोटाइड संकल्प का प्रदर्शन किया गया है, जो डीएनए या आरएनए स्ट्रैंड से सीधे न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम को पढ़ने में सक्षम नैनोपोर सेंसर बनाने की संभावना को बढ़ाता है।
संरचना
कई हेमोलिसिन की संरचना को घुलनशील और ताकना बनाने वाले अनुरूपों में एक्स-रे क्रिस्टलोग्राफी द्वारा हल किया गया है।उदाहरण के लिए, α-hemolysin ofस्टेफिलोकोकस ऑरियसजैविक झिल्ली में एक होमो-हेमपामेरिक hom-बैरल बनाता है।विब्रियो कोलरा साइटोलिसिन हालांकि एक हेमटामेरिक छिद्र बनाता है स्टेफिलोकोकस ऑरियस ys-हेमोलिसिन एक छिद्र है जो ऑक्टेमेरिक है।
से α-hemolysin का हेप्टामर स्टेफिलोकोकस ऑरियसएक मशरूम जैसा आकार होता है और व्यास में 100 like तक और ऊंचाई में 100 like होता है।एक झिल्ली-फैलाव, विलायक-सुलभ चैनल सात गुना अक्ष के साथ चलता है और 14 Å से 46 Å व्यास तक होता है।14-स्ट्रैंड एंटीपैरेलल ere बैरलथेरे के बाहरी हिस्से में लगभग 30 a चौड़ाई में एक हाइड्रोफोबिक बेल्ट है जो लिपिड बाईलेयर के नॉनपोलर हिस्से को एक सतह पूरक प्रदान करता है।इंटरफेस नमक-लिंक और हाइड्रोजन बॉन्ड, साथ ही हाइड्रोफोबिक इंटरैक्शन दोनों से बना है, और ये संपर्क एसडीएसोल्यूशंस में हेपेटामर के लिए 65 डिग्री सेल्सियस तक की आणविक स्थिरता प्रदान करते हैं।
